脂肪酸在生物中廣泛存在,脂肪酸的檢測是生物研究者常做項目,我們利用GC-MS聯用技術開發了脂肪酸檢測方法,該方法比同行中常用的方法存在以下優勢:需要樣品量較少、靈敏度高、檢出限低、可用于微量或痕量分析、數據準確。

1.樣本液氮研磨

先用液氮預冷所有試驗器材,將樣本置于研缽中,加入適量液氮,戴上防凍手套,進行研磨處理。待樣本研磨成均勻粉末狀物質后,將其轉移至EP管中,-20℃冰箱冷凍保存。

2. 試樣的稱取

樣品溶液的制備:稱取均勻試樣0.1g0.2g(精確至0.1㎎)移入到15ml的離心管中,準確加入10ul壬酸甲酯內標溶液。加入10ul質量比為4/mlBHT甲醇溶液,渦旋混勻1min90℃下衍生30min,取出放置室溫,加入2ml正己烷,加入2ml飽和氯化鈉溶液,渦旋1min后,靜置15min后取上清液分析。

3.氣相色譜質譜聯用分析條件為毛細管柱采用HP-5毛細管色譜柱,載氣為氦氣,進樣體積為1 μL;進樣口溫度:270℃分流比100:1升溫程序:初始溫度55℃,保持1min55℃205℃,升溫速率5℃/min,保持5min205℃240℃,升溫速率5℃/min,保持10min;離子源溫度,230℃,四極桿溫度150℃,溶劑延遲3min,檢測范圍:30-500Da,選擇離子監視方式(SIM)定量,SIM離子:74,55,67,79,87,69,105